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批准文号： 科研试剂

产品标签：millipore

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销售渠道：

025-86978335

产品介绍：

其他说明

Light Diagnostics狂犬病DFA试剂用于检测培养物和丙酮固定的受感染动物脑和颌下组织中的狂犬病抗原。因此，该测定可用作间接诊断人狂犬病病毒感染的辅助。通过DFA测试阴性或不确定的所有样品应通过细胞培养或动物接种方法进一步测试。

用于体外诊断用途。

测试原理

Light Diagnostics狂犬病DFA试剂使用针对狂犬病核衣壳蛋白的三种荧光素标记的单克隆抗体的混合物来检测感染组织中的病毒。将标记的抗体与可疑的狂犬病感染的组织一起孵育，并与存在的狂犬病抗原结合。通过洗涤除去未结合的抗体，并使用荧光显微镜观察抗原 - 抗体复合物。受感染细胞中的狂犬病蛋白会发出明亮的苹果绿色荧光。

摘要和说明：

狂犬病病毒感染自古以来就已为人所知（1）。野生和家养哺乳动物的所有物种都是易感的，并且可能能够将疾病传播给包括人类在内的其他动物。在狂犬病在家养犬中具有地方性的国家，仍然广泛报道与狂犬病相关的人类死亡率;狂犬病仍被世界卫生组织认为是最重要的人畜共患疾病（2）。即使在犬狂犬病受到广泛的狗疫苗接种计划控制的地区，这种疾病也可能持续存在于陆地野生动物种群和蝙蝠中。

通过将感染性唾液引入伤口，感染动物的叮咬传播病毒。通过将感染性唾液或神经组织从狂犬病动物转移到现有的切口，开放性伤口或粘膜中，很少发生非咬合传播。感染也可能来自大量的雾化病毒或感染患者的器官移植（3）。

狂犬病的诊断依赖于使用直接免疫荧光测定法（DFA）对受感染动物的脑中的病毒蛋白进行可视化。该试验在动物咬伤的管理和狂犬病的预防中起着关键作用。对狂犬病可疑动物的脑组织进行DFA检查，使实验室能够在收到样本后几小时内对狂犬病感染进行可靠的测定。这允许在暴露前预防狂犬病之前进行确定的诊断（4）。阴性诊断同样重要，因为它可以防止不必要和昂贵的暴露后抗狂犬病治疗。 DFA测试提供接近100％的灵敏度和特异性，并且是比较所有其他方法的标准（5）。

在脑组织上进行的DFA能够在Negri体可证明之前检测病毒，并且与小鼠或细胞培养中的病毒分离一样敏感（6,7,8,9,10）。使用来自多种物种的免疫动物的血清抗体产生早期狂犬病结合物（4）。最近，狂犬病核衣壳蛋白上的抗原位点特异性单克隆抗体已用于提供高度特异性和均一的染色反应（10），背景染色减少（4）。

组件

狂犬病DFA试剂（浓缩物） - （目录号5100）一个小瓶含有5mL浓缩的FITC标记的单克隆抗体混合物，该抗体针对狂犬病毒，缓冲液中含有蛋白质稳定剂和0.1％叠氮化钠作为防腐剂。

物理形式

所需材料但未提供：

·荧光显微镜，具有适当的滤光片组合，用于FITC（激发峰= 490nm，发射峰= 515nm），放大倍数为100倍，200倍和400倍（干物镜）。

·培养箱（37°C±1°C）

·潮湿的房间

·Coplin染色罐

·盖玻片（1号）

·磷酸盐缓冲盐水（PBS）（目录号5087或同等产品）

·狂犬病试剂稀释剂（目录号5070）或等同物（含有1.0％牛血清白蛋白（BSA）的PBS，级分V）。

·去离子水或蒸馏水

·适用于狂犬病免疫荧光的安装液10％缓冲甘油，pH 8.0及以上。

·带有疏水涂层或丙烯酸笔或蜡笔的显微镜载玻片，以标记未涂布的载玻片

·均质机（气溶胶密封）

·正常和感染的小鼠脑悬浮液

组件

注意：工作稀释必须通过用户滴定试剂来确定。

使用声明

用于体外诊断用途

CE标志

在2-8°C下储存时，试剂在标签上印刷的失效日期内保持稳定。

稀释的试剂可以等分并储存在-20℃。避免反复冻融。

在试剂盒有效期后丢弃任何剩余的试剂。

警告和注意事项：

·用于体外诊断用途。应仔细遵循使用说明。

·试剂中存在的叠氮化钠，如果摄入则是有毒的。叠氮化钠可与铅和铜管道反应形成高度爆炸性的金属叠氮化物。处理溶液时，请用大量水冲洗，以防止叠氮化物积聚

·不要用吸管试剂。

·处理与其接触的所有标本，载玻片和材料具有潜在的传染性。用0.05％次氯酸钠去污。所有测试材料应在使用后通过焚烧或蒸汽高压灭菌灭活。

·汇集或更改任何试剂可能会导致错误的结果。

·在染色过程中，不要让试剂在载玻片上干燥。

·如果吞咽或吸入，丙酮极易燃，有害。远离热源，火花或火焰。使用足够的通风，避免吸入蒸气。荧光显微镜的性能对于获得令人满意的测试结果至关重要。显微镜物镜，灯泡强度和瓦数以及滤光片可能会影响结果。

·不应使用明显混浊的工作稀释。

注意：所有已知或疑似狂犬病感染组织的手术必须由狂犬病免疫人员按照公认的生物安全2级做法进行。此外，任何有可能产生传染性气溶胶的操作或程序都应在II类生物安全柜中进行。应穿着合适的防护服。

• 荧光诊断仪
• 荧光生物显微镜
• 荧光免疫分析仪
• 荧光检查棒
• 荧光定量pcr仪